La Amazonía ecuatoriana es uno de los ecosistemas más biodiversos del planeta, sin embargo, gran parte de sus recursos fúngicos continúan subvalorados. Entre ellos, el hongo medicinal del género Trametes representa un organismo de alto interés por su potencial terapéutico y biotecnológico, gracias a la producción de metabolitos secundarios que se asocian con numerosas actividades biológicas. A pesar de su relevancia mundial, en Ecuador existe escasa documentación científica sobre las especies locales de Trametes, particularmente en lo que respecta a su composición química y actividad biológica. El presente estudio tiene como objetivo evaluar el perfil químico y las actividades biológicas de los extractos del cuerpo fructífero, micelio y líquido de fermentación de Trametes sp., recolectado en la Reserva Biológica Colonso Chalupas. Para ello, se determinó el contenido de compuestos bioactivos en los extractos, mediante pruebas químicas cualitativas y cuantitativas. Además, se evaluó la capacidad antimicrobiana, el potencial anticancerígeno sobre células MCF7 y su toxicidad hemolítica mediante ensayos de viabilidad celular, migración transmembrana y hemólisis. Los resultados destacan a Trametes sp. como una fuente prometedora de compuestos bioactivos con potencial farmacológico contra una variedad de patógenos y líneas celulares de cáncer. En consecuencia, proporcionamos un análisis químico y biológico de Trametes sp. donde reportamos, el primer estudio de esta especie de hongo para la Amazonía ecuatoriana, lo que resalta la importancia de conservar la biodiversidad amazónica y sus recursos fúngicos.