La hiperglucemia posprandial constituye una de las primeras manifestaciones de la diabetes mellitus tipo II. Esta condición se origina por una producción insuficiente de insulina tras la ingesta de carbohidratos, que incrementa la concentración de glucosa en sangre y favorece el desarrollo de complicaciones cardiovasculares. Entre las terapias utilizadas para su control destacan los inhibidores de enzimas digestivas, que retrasan la hidrólisis de carbohidratos y atenúan los picos glucémicos; no obstante, su uso prolongado se asocia con efectos adversos gastrointestinales, lo que ha impulsado la búsqueda de alternativas naturales a partir de extractos vegetales. Si bien las formulaciones de origen vegetal son una fuente de compuestos bioactivos con potencial terapéutico, la falta de procedimientos estandarizados para la recolección y el procesamiento afecta directamente en su composición química y actividad biológica. En este contexto, el presente estudio evaluó la variación del perfil metabolómico mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas, así como la capacidad inhibitoria de la enzima α-glucosidasa de extractos hidroetanólicos de hojas jóvenes y adultas de Ilex guayusa colectadas en Talag, Pano y Tena, provincia de Napo. Los análisis metabolómicos evidenciaron que las hojas jóvenes de Talag y Pano presentan una mayor diversidad de metabolitos bioactivos, mientras que en Alto Tena no se observaron diferencias entre estados de madurez. Del mismo modo, se determinó que la edad influye en la actividad hipoglucémica, siendo más elevada en hojas jóvenes de Pano (IC₅₀ de 63.96 ± 4.70), con inhibición cercana a la acarbosa (IC₅₀: 48.79 ± 0.80). Este efecto puede estar relacionado con la presencia de vanillina, un metabolito previamente reportado con actividad hipoglucémica. Los hallazgos de este estudio aportan información para establecer protocolos de colecta de I. guayusa que contribuyan a aumentar su potencial terapéutico en el tratamiento de enfermedades crónicas.